Description
EZscriptⓇ cDNA Synthesis kit는 RNA를 template로 first strand cDNA합성에 필요한
역전사효소 (Reverse transcriptase), Buffer, dNTP, DTT 등이 포함된 제품.
포함된 RTase는 Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV)로부터 개발된 높은 내열성을 갖는
recombinant M-MLV RTase (RNase H-)로 50℃에서 최적의 활성을 보이며 이는 RNA의
2차 구조 (hairpin 구조 등)형성을 억제할 수 있어 높은 cDNA 합성 효율을 가능하게 함.
또한 RNase H 활성을 제거하여 cDNA 합성 과정에서 생성되는 RNA/DNA hybrid를 분해하지 않기
때문에, 긴 size의 cDNA 합성이 가능 하므로 cDNA라이브러리 제작에 용이함.
Source | M-MLV | cDNA length |
|
Reaction Temperature | 42-55℃ | Applicable Primers | Random primer, Oligo d(T) primer, Gene-specific primer |
RNase H activity | RNase H- |
Applications
■ First-strand cDNA synthesis
■ Two-Step RT-PCR
■ cDNA library construction
■ Primer extension analysis
Caution
■ 가급적 제품 보관 온도를 일정하게 (-20℃) 유지
■ First-strand dDNA 합성은 PCR기기 또는 Lid-heating 가능한 Heat block에서 실시
■ 50℃에서 RT반응 수행할 경우, water-bath등의 사용은 반응액의 증발을 초래함.
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