[E-BC-K034-S] Vitamin C (VC) Colorimetric Assay Kit 요약정보 및 구매

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General information

Detection significance


Vitamin C (VC) is involved in the synthesis of collagen in the body. The deficiency of VC will result in impaired wound healing and increased vascular fragility. VC is a strong reducing agent, which can reduce Fe3+ to Fe2+ and promote the iron absorption in intestinal. VC can be used as scavenger of free radical and it can remove O2- and OH-. Therefore, VC can protect the body from the damage of endogenous oxygen free radicals, and can reduce the α2-tocopherol free radicals to vitamin E. VC is the most effective antioxidant in organism.

Detection principle


The most obvious chemical activity of VC is that reduce Fe3+ to Fe2+, then promote iron absorption in the intestine, promote the storage and utilization of iron. Fe3+ react immediately with reducing ascorbic acid to form Fe2+ .then Fe2+ react with phenanthroline and the color developing reaction occurs. The content of vitamin C in plasma can be determined. Measure the OD value and calculate the VC content indirectly.

Operation procedures

Operation steps


1.    Blank well: add 0.4 mL of Reagent 1 application solution to the 5 mL EP tube.

Standard well: add 0.4 mL of 6 μg/mL standard solution to the 5 mL EP tube.

Sample well: add 0.4 mL of the upper clear liquid in sample preparation step to the 5 mL EP tube.  

2.    Add 0.5 mL of Reagent 2, 1 mL of Reagent 3 application solution and 0.25 mL of Reagent 4 application solution.

3.    Mix fully with a vortex mixer and incubate at 37℃ water bath for 30 min.

4.    Add 0.1 mL of Reagent 5 and mix fully with a vortex mixer.

5.    Stand for 10 min at room temperature. Set the spectrophotometer to zero with double-distilled water and measure the OD values of each tube at 536 nm with 1 cm optical path cuvette.

Operation table


 

 

Blank tube

Standard tube

Sample tube

Reagent 1 application solution (mL)

0.4

 

 

6 μg/mL standard solution (mL)

 

0.4

 

The upper clear liquid (mL)

 

 

0.4

Reagent 2 (mL)

0. 5

0.5

0.5

Reagent 3 application solution (mL)

1

1

1

Reagent 4 application solution (mL)

0.25

0.25

0.25

Mix fully and incubate at 37 water bath for 30 min.

Reagent 5 (mL)

0.1

0.1

0.1

Mix fully and stand for 10 min at room temperature. Set the spectrophotometer to zero with double-distilled water and measure the OD values of each tube at 536 nm with 1 cm optical path cuvette.

Performance characteristics

Technical parameter


Detection range0.35-20 μg/mLAverage inter-assay CV3.3%
Sensitivity0.35 μg/mLAverage intra-assay CV2.3%
Average recovery rate104%  

 

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